1、前言

熊去氧膽酸作為名貴中藥熊膽的主要有效成分，在臨床治療各類膽疾及消化道疾病方面效果顯著。隨著天然熊膽資源的日益減少，人工合成及半合成熊去氧膽酸成為亟待攻克的研究重點(diǎn)。本方案旨在利用上海佳航的 Digipol-P630 全自動(dòng)數(shù)字旋光儀，測(cè)定不同原料合成的熊去氧膽酸的比旋度，助力科研人員篩選出更優(yōu)的合成原料，為熊去氧膽酸的工業(yè)化生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支持。

2、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

2.1 試驗(yàn)設(shè)備

?

1>?Digipol-P630 全自動(dòng)數(shù)字旋光儀

2>溫控試管（適配 Digipol-P630）

3>精密天平（精度達(dá)千分）

4>100mL 容量瓶。

Digipol-P630 全自動(dòng)數(shù)字旋光儀具備高精度的旋光檢測(cè)能力，能快速準(zhǔn)確地測(cè)量樣品旋光度；精密天平可確保稱取樣品質(zhì)量的準(zhǔn)確性；100mL 容量瓶用于配制樣品溶液。

2.2 實(shí)驗(yàn)試劑

1.?從天然熊膽分離、精制得到的熊去氧膽酸，作為對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品。

2.?以雞膽為原料合成的熊去氧膽酸，探究雞膽來(lái)源產(chǎn)品的特性。

3.?以牛膽、羊膽為原料合成的熊去氧膽酸，對(duì)比不同動(dòng)物膽源合成產(chǎn)品的差異。

4.?無(wú)水乙醇，作為樣品的溶解溶劑。

3、實(shí)驗(yàn)步驟

3.1 樣品測(cè)試

1.?使用精密天平準(zhǔn)確稱取 6.000g 樣品。先將少量無(wú)水乙醇加入樣品中，充分?jǐn)嚢枋蛊淙芙猓S后將溶解后的溶液小心移入 100mL 容量瓶。再用無(wú)水乙醇多次沖洗溶解樣品的容器，將沖洗液一并倒入容量瓶，*加無(wú)水乙醇至容量瓶標(biāo)線，輕輕搖勻，制成濃度為 6g/100ml 的樣品溶液備用。

2.?接通 Digipol-P630 全自動(dòng)數(shù)字旋光儀電源，開啟儀器，預(yù)熱 10 - 15 分鐘，確保儀器達(dá)到穩(wěn)定工作狀態(tài)。

3.?在儀器操作界面上，將測(cè)試模式設(shè)置為比旋度模式，根據(jù)樣品溶液濃度，設(shè)置濃度參數(shù)為 6g/100ml，同時(shí)將試管長(zhǎng)度設(shè)置為 100mm（若使用的溫控試管長(zhǎng)度固定為 100mm，此步可省略確認(rèn)操作 ）。

4.?用注射器吸取無(wú)水乙醇，緩慢注入溫控試管，直至充滿。將注滿無(wú)水乙醇的溫控試管小心放入儀器試樣室，在儀器操作界面上點(diǎn)擊 “清零” 按鈕，消除乙醇溶劑對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響，確保后續(xù)測(cè)量的準(zhǔn)確性。

5.?取出溫控試管，將其中的無(wú)水乙醇倒掉。用配制好的樣品溶液對(duì)試管進(jìn)行涮洗 2 - 3 次，確保試管內(nèi)壁殘留的溶劑被完全置換。然后，用注射器吸取適量樣品溶液注入溫控試管，保證溶液中無(wú)氣泡。

6.?將加完樣的溫控試管放回試樣室，把配套的測(cè)溫探頭插入恒溫試管。在儀器操作界面上，將控制溫度設(shè)定為 20℃，打開控溫按鍵，啟動(dòng)溫控功能。待試樣溫度穩(wěn)定在 20℃后，點(diǎn)擊 “測(cè)試” 按鈕，儀器將自動(dòng)測(cè)量并顯示樣品的比旋光度數(shù)值。

3.2 樣品計(jì)算

采用公式進(jìn)行計(jì)算。其中，α 代表旋光度，由 Digipol-P630 全自動(dòng)數(shù)字旋光儀測(cè)量直接獲得；[a]D20?是比旋光度常數(shù)；c 表示質(zhì)量濃度，本實(shí)驗(yàn)中為 0.06g/ml（6g/100ml 換算所得）；L 為旋光管長(zhǎng)度，此處為 1dm（100mm 換算所得 ）。通過(guò)該公式，可準(zhǔn)確計(jì)算出不同樣品的比旋光度。

4、結(jié)果與討論

4.1 測(cè)試界面

Digipol-P630 全自動(dòng)數(shù)字旋光儀操作界面簡(jiǎn)潔直觀，在測(cè)試過(guò)程中，可實(shí)時(shí)顯示測(cè)量參數(shù)，如濃度、試管長(zhǎng)度、測(cè)量次數(shù)、測(cè)量模式（比旋度模式）等。同時(shí)，還能顯示測(cè)量進(jìn)度和實(shí)時(shí)測(cè)量結(jié)果。測(cè)量完成后，可直接在界面上查看*終比旋光度數(shù)值，并可選擇將數(shù)據(jù)保存至儀器內(nèi)置存儲(chǔ)或?qū)С鲋镣獠看鎯?chǔ)設(shè)備，方便后續(xù)分析處理。

4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，不同原料制得的熊去氧膽酸在熔點(diǎn)（M.P.）和比旋光度方面存在一定差異。這表明原料的種類及合成過(guò)程對(duì)產(chǎn)品的物理性質(zhì)有顯著影響。其中，用雞膽為原料合成的熊去氧膽酸在熔點(diǎn)和比旋光度上，相較于用牛、羊膽為原料合成的熊去氧膽酸，更接近由天然熊膽精制的熊去氧膽酸。

4.3 討論

不同原料的主要成分分子結(jié)構(gòu)存在差異，在合成熊去氧膽酸的過(guò)程中，加工方法以及使用的化工試劑也有所不同，這些因素導(dǎo)致*終產(chǎn)品中含有不同成分的微量副產(chǎn)品，進(jìn)而使得產(chǎn)品的物理常數(shù)出現(xiàn)差異。雞膽來(lái)源的熊去氧膽酸在物理常數(shù)上與天然熊膽精制產(chǎn)品更為接近，這為熊去氧膽酸的合成原料選擇提供了重要參考，在后續(xù)研究和工業(yè)化生產(chǎn)中，可進(jìn)一步探索以雞膽為原料的合成工藝優(yōu)化，提高產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量。

?